炮制方法对水蛭氨基酸成分的影响
发布日期:2011/5/11 阅读:2703 来源:原创:(本文作者广西南宁市第二人民医院 樊小容)
按常规方法制奋水解液,用氨基酸自动分析仪进行氨基酸定量分析。结果氨基酸总量烫制品高于水蛭生品。表明临床应
用以烫水虹为佳水蛭属虫类药,富含各种氨基酸。新鲜水蛭唾液
中含有一种抗凝血物质名水蛭素(Hirudin),也是蛋白质肽类,水解后也生成氨基酸。因此,测定水蛭氨基酸炮制前后的含量变化对水蛭效价是有重要作用的。
1 仪器与材料
1.1 仪器日立835-50氨基酸自动分析仪。仪器工作条件:分析柱2.6×1 50 mm,树脂日立2619,柱温53℃ ,反应温度98 C,缓冲液流速0.225m1.min-1。
1.2 材料水蛭为南宁市药材公司购进。经药检所
鉴定为环节动物水蛭科的宽体金线蛭Whitmania pigra(Whitman)的干燥全体。
2 方法与结果
2.1 烫水蛭的制备取滑石粉置铁锅内,加热至1800C时放入水蛭生品,快速翻炒,烫至水蛭表面鼓起有焦鱼昧时,迅速筛去滑石粉,放凉备用。
2.2 供试液的制备精密称取水蛭生品及烫水蛭样品粉50 mg置安瓿中,加入6 mo1.L-1 盐酸2Oml,抽真空密封,恒温110℃水解24 h,过滤,滤液移至蒸发皿中,水分挥干,加水调节至每毫升相当于
0.02 g生药备用。
2.3 蛋白质氨基酸测定
将待测样品溶液加适量缓冲液定容,经氨基酸自动分析仪定量氨基酸,测定结果(见表1)。
3 讨论
实验结果表明,水蛭含l4种氨基酸,其中8种为人体必需氨基酸,氨基酸总量水蛭生品为27.85% ,烫水蛭为54.89% ,烫水蛭的含量明显高于水蛭生品,说明烫水蛭有利于药物有效成分的大量溶出。临床应用以烫水蛭为佳,符合传统用药习惯。水蛭性平味咸、苦。归肝经具有破血逐瘀的功效。临床上可用于脑血管疾病、精液不化、前列腺肥大,子宫卒中综合征等症的治疗。现代药理研究证明水蛭醇提物有抗血栓作用。古代传统炮制水蛭的目的概括起来有四点:一是防止水蛭“入腹生子为害”;二是去腥矫昧;三是便于粉碎;四是减毒,增强逐瘀作用。本实验通过测水蛭炮制前后氨基酸的含量变化,也证明了水蛭炮制后入药能更好的发挥其临床疗效。
表1 水蛭,烫水蛭中的氨基酸含量(%)
丝氨酸 6.89 1.02
组氨酸 1.80 1.42
甘氨酸 0.98 1.48
苏氨酸 * 0.88 8.77
精氨酸 1.40 1.57
丙氨酸 1.02 2.67
酪氨酸 1.69 1.58
色氨酸 * 1.00 1.97
甲硫氨酸 * 0.91 3.21
缬氨酸 1.32 9.87
苯丙氨酸 * 7.34 3.84
异亮氨酸 * 0.86 3.56
亮氨酸 * 1.17 8.40
赖氨酸 * 1.09 6.75
氨基酸总量 27.85 54.89